DAB显色试剂盒(20×)参考价: ¥135
价格: ¥115
货品编号: DY7502
规格:
1ml
|
DAB显色试剂盒(20×) | ||||||||
DAB Kit(20×) | ||||||||
Cat No:DY7502 | ||||||||
Size:1ml/3ml | ||||||||
产品组分 | ||||||||
组分 Contents | DY7502 1ml | DY7502A 3ml | ||||||
DAB-试剂 A(20×) | 1ml | 3ml | ||||||
DAB-试剂 B(1×) | 20ml | 60ml | ||||||
储运条件 | ||||||||
2-8℃保存 | ||||||||
说 明 | ||||||||
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。 | ||||||||
产品简介 | ||||||||
DAB(3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride)是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物,在辣根过氧化物酶的催化下,DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。 本试剂盒适用于HRP系统的的免疫组化中的组织切片、细胞爬片以及Western Blot中PVDF膜、NC膜等的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为褐色的化合物,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。 |
||||||||
实验前准备及注意事项 | ||||||||
1.DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。 | ||||||||
2.工作液现配现用,配制好的工作液2-8°C避光1小时内有效。 | ||||||||
3.工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。 | ||||||||
4. 显色后的组织切片或细胞爬片可用苏木精或甲基绿复染。 | ||||||||
5. 对于组织切片,以每张切片用50 µl显色工作液计算,1 ml 20×DAB为400张切片的 用量,3 ml为1200张切片的用量。 | ||||||||
6. 为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。 | ||||||||
7. 显色后若背景太深,可以考虑延长封闭时间,避免非特异性染色,或者缩短DAB的显色时间;显色后若显色太弱或没有显色,可以考虑增加一抗或二抗的浓度,或者适当延长显色时间。 |
操作说明 | ||||||||
1.DAB显色工作液配制: | ||||||||
根据需要量,将试剂A和试剂B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50 µl)试剂A,混匀即可。 | ||||||||
2.显色: | ||||||||
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到DAB 工作液中)即可显色。显色时间一般为1-5min。显色完毕后,将膜浸入水中,终 止反应。 |
||||||||
2)组织切片或细胞爬片显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或 细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5min。显微镜下观察控制显色时间,当 达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。 |