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DAB显色试剂盒(20×)

参考价:  135
价格:  ¥115
货品编号:  DY7502
规格:   1ml
 



DAB显色试剂盒(20×)
DAB Kit(20×)
Cat No:DY7502
 Size:1ml/3ml
产品组分
组分 Contents DY7502   1ml  DY7502A  3ml 
DAB-试剂 A(20×)  1ml 3ml
DAB-试剂 B(1×)  20ml 60ml
储运条件
2-8℃保存
说    明
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。
产品简介
    DAB(3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride)是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物,在辣根过氧化物酶的催化下,DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。                                                                  
    本试剂盒适用于HRP系统的的免疫组化中的组织切片、细胞爬片以及Western Blot中PVDF膜、NC膜等的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为褐色的化合物,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
实验前准备及注意事项
1.DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
2.工作液现配现用,配制好的工作液2-8°C避光1小时内有效。
3.工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
4. 显色后的组织切片或细胞爬片可用苏木精或甲基绿复染。
5. 对于组织切片,以每张切片用50 µl显色工作液计算,1 ml 20×DAB为400张切片的 用量,3 ml为1200张切片的用量。
6. 为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
7. 显色后若背景太深,可以考虑延长封闭时间,避免非特异性染色,或者缩短DAB的显色时间;显色后若显色太弱或没有显色,可以考虑增加一抗或二抗的浓度,或者适当延长显色时间。
操作说明
1.DAB显色工作液配制:
   根据需要量,将试剂A和试剂B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50 µl)试剂A,混匀即可。
2.显色:
  1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到DAB 
工作液中)即可显色。显色时间一般为1-5min。显色完毕后,将膜浸入水中,终 
止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或 
细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5min。显微镜下观察控制显色时间,当 达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。