DNaseⅠ(RNaseFree) | ||||||||
Cat No:LY6060 | ||||||||
产品组分 | ||||||||
组分 Contents | LY6060 | |||||||
DNaseⅠ(RNaseFree),1U/µl | 1ml | |||||||
ReactionBuffer(withMgCl2),10× | 1ml | |||||||
200mMEDTA | 1ml | |||||||
储运条件 | ||||||||
本试剂保存在-20℃,避光。保质期一年 | ||||||||
说 明 | ||||||||
1. 本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。 | ||||||||
产品简介 | ||||||||
DNaseI 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链 DNA。其原理为 DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或 Mn2+都可以激活 DNaseI 的活性,而 Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链 DNA 的每条单链上随机地产生切口;而在 Mn2+存在下可使双链 DNA 断裂,使DNA 片段化。用于无 DNA 污染的 RNA 的制备,逆转录及体外转录等实验。 | ||||||||
使用说明 | ||||||||
1. 以制备用于RT-PCR的RNA样品为例,配置10µl反应体系,如下表: | ||||||||
组分 | 体积 | 终浓度 | ||||||
RNA | Xµl | 1µg | ||||||
ReationBuffer(withMgCl2),10× | 1µ | 1× | ||||||
Dnase I(RNaseFree) | 1µ | 1U | ||||||
RNaseFreeWater | Yµ | 补足至10µl | ||||||
2. 37℃孵育30分钟。 | ||||||||
3. 加入1µl200mMEDTA,65℃孵育10分钟,使Dnase I 失活,终止反应。 | ||||||||
4. 处理后的RNA可用于RT-PCR |