土壤基因组提取试剂盒

土壤基因组 DNA 提取试剂盒
SoilGenDNAKit
离心柱式
Cat No:LY6028
Kit Size:50T


产品组分
		组分 Contents	50preps
		Buffer 1#	60ml
		Buffer 2#	30ml
		Buffer 3#	30ml
		Buffer 4#(concentrate)	13ml
		Buffer 5#(concentrate)	13ml
		Buffer 6#(concentrate)	15ml
		Buffer 7#	15ml
		离心管	50
		吸附柱	50
		收集管(2ml)	50

储运条件
	本试剂盒室温（15-25℃）条件下可保存12个月，更长时间保存可置于2-8℃。

说明
	本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途。
产品简介
	本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便，单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5 μg以上的DNA，片段长度主要在20-30 kb之间。德元国际开发的土壤基因组提取试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸，通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上，土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-TimePCR、文库构建、SouthernBlot、分子标记等下游实验。
实验前准备及注意事项
	1. 本实验需要无水乙醇，70%乙醇，请自备。
	2. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。。
	3. 全部离心步骤可在室温下进行。
	4. 使用前请检查Buffer2#和Buffer3#是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer2#和Buffer3#于56℃水浴重新溶解。
	5. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer 4#、Buffer 5#、Buffer 6#中加入无水乙醇。

操作步骤
	1．取0.1g-0.3g 土壤样本，置于离心管（自备）中，加入1mlBuffer1# 12,000rpm（~13,400×g）离心 1 min，倒掉上清。
	2．加入 750 μl 70%乙醇，涡旋振荡 1 min（须将管底的土壤震起来），12,000 rpm 离心 1 min，倒掉上清，用移液器将余液吸尽。
	3. 向沉淀中加入500 μlBuffer2#，涡旋振荡 1-3 min（须将管底的土壤震起来），65℃水浴 20 min（可每隔 5 分钟涡旋振荡 5 s），12,000rpm 离心 3 min，将上清移至新的离心管（自备）中。
	4．向上清液中加等体积 Buffer3#，颠倒混匀 15-25 次，冰上放置 5 min。12,000rpm 离心 5 min。
	注意：冰上放置后液体可能会凝结，属正常现象。
	5．将步骤 4 所得溶液全部加入吸附柱中(吸附柱应预先装入收集管中)，一次最多不超过700 μl，可分多次转入。10000 rpm离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
	6．向吸附柱中加入500 μlBuffer4#（使用前检查是否已加入无水乙醇），10,000rpm 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
	7．向吸附柱中加入500 μlBuffer5#（使用前检查是否已加入无水乙醇），10,000rpm 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
	8．向吸附柱中加入500 μlBuffer6#（使用前检查是否已加入无水乙醇），10,000rpm 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
	注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
	9. 12,000rpm离2min，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
	注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
	10. 将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μl Buffer 7# ，室温放置2-5min，10,000rpm离心1min，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
	注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
	2）离心之前室温孵育5min可以增加产量。
	3)为了增加产量可以再次加入50-100μl Buffer 7# ，室温放置2-5min，10,000rpm离心1min，收集DNA溶液。
	4）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer7#洗脱并于-20℃保存。
	5）如果要提高DNA的终浓度，可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，室温放置2-5min，10,000rpm离心1min，收集DNA溶液，-20℃保存。
	6）基因组DNA模板中微量的残余腐殖酸可能对PCR反应产生不良影响。此时将DNA稀释5-100倍问题通常即可解决。如经稀释后的DNA仍不能有效应用于PCR反应，请使用腐殖酸清除剂，以获得更高效的清除效果。

咨询类型：	商品咨询
咨询内容：
联系方式：
*验证码：

全部商品分类

新闻公告

关于德元

德元动态

企业文化

代理商信息

购物指南