口腔拭子基因组提取试剂盒

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参考价：￥450

价格：￥405

货品编号： LY6009

规格： 50T

口腔拭子基因组 DNA 提取试剂盒
SwabGen DNA Kit
离心柱式
Cat No:LY6009
Kit Size:50T


产品组分
		组分 Contents	50preps
		Buffer 1#	30ml
		Buffer 2#	30ml
		Buffer 3#(concentrate)	13ml
		Buffer 4#(concentrate)	15ml
		Buffer 5#	15ml
		Buffer 6#	1ml
		离心管	50
		吸附柱	50
		收集管(2ml)	50

储运条件
	本试剂盒中Buffer 6#保存在-20℃，可保存12个月。其它组分室温（15-25℃）条件下可保存12个月，更长时间保存可置于2-8℃。

说明
	本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途。
产品简介
	本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统，高效专一吸附DNA，每个拭子可得到0.5-3.5 μg基因组DNA，提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
实验前准备及注意事项
	1. 本实验需要无水乙醇，请自备。
	2. Buffer 6#勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
	3. 全部离心步骤可在室温下进行。
	4.使用前请检查 Buffer 2# 是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将 Buffer 2# 于 56℃水浴孵育恢复澄清。
	5. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer 3#和Buffer 4#中加入无水乙醇。
	6. 取样：使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次，晾干2h保存。（为确保样本丌被食物或饮料污染，取样前30分钟内请勿进食和饮水）。

操作步骤
	1．将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下置于2 ml 离心管（自备）中，加入400 μl Buffer 1#。
	注意：如需无RNA污染的基因组DNA，可加入4 μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液（Cat No:LY5012），震荡混匀。
	2．加入20 μl Buffer 6# 和 400 μl Buffer 2#，立即涡旋震荡15秒，充分混匀。
	注意：加入Buffer 2#后立即充分混匀；不可将Buffer 6#直接加入Buffer2#中使用。
	3． 56℃ 孵育10min，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
	4．加入400 μl 无水乙醇，涡旋震荡充分混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
	注意：加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
	5．将步骤 4 所得溶液全部加入吸附柱中(吸附柱应预先装入收集管中)，一次最多不超过700 μl，可分多次转入。8000rpm 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
	6. 向吸附柱中加入500 μlBuffer 3#（使用前检查是否已加入无水乙醇），8000rpm 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
	7. 向吸附柱中加入500 μlBuffer 4#（使用前检查是否已加入无水乙醇），14,000 rpm离心3min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
	注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
	8. 14,000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
	注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
	9. 将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入50 μl Buffer 5# 或灭菌水，室温放置2-5min，8000rpm离心1min，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
	注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
	2）离心之前室温孵育5min可以增加产量。
	3）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer5#洗脱并于-20℃保存。

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