包涵体蛋白溶解液 | ||||||||
InclusionbodyDenatureReagent | ||||||||
Cat No:DY7007 | ||||||||
Size:100ml | ||||||||
产品组分 | ||||||||
组分 Contents | DY7007 | |||||||
包涵体蛋白溶解液 | 100 ml | |||||||
储运条件 | ||||||||
2 - 8 ℃ 保存。 | ||||||||
说 明 | ||||||||
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。 | ||||||||
产品简介 | ||||||||
包涵体是重组蛋白因为过度表达、蛋白无足够时间进行肽链折叠,部分折叠中间态之间的特异性错误聚合形成的一种不溶性结构。这些基因表达产物的氨基酸序列虽然正确,而其立体结构是错误的,因此一般没有生物活性。包涵体一般含有 50%以上的重组蛋白,其余为外源蛋白、核糖体元件、RNA 聚合酶、内毒素、外膜蛋白 ompC、ompF 和 ompA 等、核酸(环状或缺口的质粒 DNA),以及脂体、脂多糖等,无定形,呈非水溶性,只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。 使用本产品提取包涵体蛋白,可增加包涵体蛋白的溶解性,提高包涵体蛋白的提取效率,变性剂可通过透析去除。 | ||||||||
实验前准备及注意事项 | ||||||||
1.本试剂含有变性剂,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。 | ||||||||
2. 在低于4℃的保存温度下易出现絮状沉淀,使用时恢复至室温,絮状沉淀溶解后即可进行后续步骤。 | ||||||||
操作步骤 | ||||||||
1. 用细菌裂解液或其他方法裂解菌液后提纯包涵体。 | ||||||||
2. 1g 包涵体湿重中加入8ml 包涵体蛋白溶解液(粗略估算包涵体湿重)。 | ||||||||
3. 加入溶解液后混匀,振摇孵育 30 min。 | ||||||||
4. 离心去除细胞碎片。 | ||||||||
5. 收集上清液,进行后续步骤测试。 | ||||||||