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BCA微量蛋白定量试剂盒

参考价:  450
价格:  ¥405
货品编号:  DY7051
规格:   1500T
 



微量 BCA 蛋白定量试剂盒
MicroBCAProteinAssayKit
Cat No:DY7051
 Size:1500T
产品组分
组分 Contents 1500 次/微孔
试剂A 120ml
试剂B 120ml
试剂C 6ml
标准品(2mg/ml 2 ml 
储运条件
标准品2-8℃保存,其它组分室温保存。
说    明
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。
产品简介
    BCA 蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于 BCABicinchoninicAcid)法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与 Cu2+络合生成络合物,同时将 Cu2+还原成 Cu+BCA 试剂可敏感特异地与 Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物。在 562nm 处有高的光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒专为低蛋白浓度样品的蛋白定量而设计,可精确测定浓度为 2.5-200 μg/ml 的蛋白溶液,试剂盒的灵敏性高,平行性好,不同种蛋白之间的测量差异极低。本试剂同多种非离子型去污剂有较好的相容性。
实验前准备及注意事项
1.本产品可以采用酶标仪(微孔检测法)测定蛋白浓度。
2.建议每次测定蛋白样品时,绘制标准曲线,以获得准确数据。
3.BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。
操作步骤
1.稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
管号  稀释液用量(μl)  BSA标准品
用量(μl) 
BSA标准品最终浓
度(μg/μl) 
A 360 40 200
B 400 100(从A管中取) 40
C 250 250(从B管中取) 20
D 250 250(从C管中取) 10
E 250 250(从D管中取)  5
F 250 250(从E管中取)  2.5
G 250 0 0(空白)
2.配制 Micro  BCA 测试工作液:根据标准品和样品的数量配制测试液。
    1) 配制初始工作液
         初始工作液: 试剂C与试剂B按1:25(体积比)比例配制
    2)测试工作液配制
         测试工作液:  初始工作液与试剂A按1:1(体积比)比例配制
   充分混匀后备用。
3. 试管及微板检测(蛋白浓度检测范围:2.5-200 μg/ml)
   1)按上表准备好标准品及待测样品。
   2)将蛋白样品和测试工作液按照 1:1(体积比)比例加入,充分混匀。在 60 ℃孵育 60 min。
   3)孵育完成后冷却到室温,在 562nm 处读取吸光度值。
   4)标准品与待测样品的吸光度值要扣除空白对照的吸光度值,然后进行浓度的计算。
   5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
                         附表 干扰物质表
化合物 耐受浓度 化合物 耐受浓度
缓冲液 去垢剂和变性剂 
乙酸盐 0.2M  Brij35 1%
甘氨酸 1M  CHAPS 1%
HEPES 0.1M 盐酸胍 4M 
MES  50mM NP-40 1%
MOPS  50mM 辛葡糖 1%
Na+-柠檬酸  <1mM SDS 1%
PIPES 50mM Triton X-100 1%
磷酸钠  0.1M 糖类
乙酸钠 0.2M pH 5.5  葡萄糖  10mM
TES 50mM 蔗糖  1M 
Tris 0.1M  螯合剂 
盐类  EDTA 10mM
硫酸铵  干扰  还原剂
NaCl 1M  β-巯基乙醇 50μM 
尿素  3M DTT 1mM
极性化合物 其他 
DMSO 5% 脂类  干扰
甘油 10% HCl/NaOH 0.1M