BCA微量蛋白定量试剂盒参考价: ¥450
价格: ¥405
货品编号: DY7051
规格:
1500T
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微量 BCA 蛋白定量试剂盒 | ||||||||
MicroBCAProteinAssayKit | ||||||||
Cat No:DY7051 | ||||||||
Size:1500T | ||||||||
产品组分 | ||||||||
组分 Contents |
1500 次/微孔 |
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试剂A | 120ml | |||||||
试剂B | 120ml | |||||||
试剂C | 6ml | |||||||
标准品(2mg/ml) | 2 ml | |||||||
储运条件 | ||||||||
标准品2-8℃保存,其它组分室温保存。 | ||||||||
说 明 | ||||||||
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。 | ||||||||
产品简介 | ||||||||
BCA 蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于 BCA(BicinchoninicAcid)法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与 Cu2+络合生成络合物,同时将 Cu2+还原成 Cu+。BCA 试剂可敏感特异地与 Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物。在 562nm 处有高的光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒专为低蛋白浓度样品的蛋白定量而设计,可精确测定浓度为 2.5-200 μg/ml 的蛋白溶液,试剂盒的灵敏性高,平行性好,不同种蛋白之间的测量差异极低。本试剂同多种非离子型去污剂有较好的相容性。 | ||||||||
实验前准备及注意事项 | ||||||||
1.本产品可以采用酶标仪(微孔检测法)测定蛋白浓度。 | ||||||||
2.建议每次测定蛋白样品时,绘制标准曲线,以获得准确数据。 | ||||||||
3.BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。 |
操作步骤 | ||||||||
1.稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。 | ||||||||
管号 | 稀释液用量(μl) |
BSA标准品 用量(μl) |
BSA标准品最终浓 度(μg/μl) |
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A | 360 | 40 | 200 | |||||
B | 400 | 100(从A管中取) | 40 | |||||
C | 250 | 250(从B管中取) | 20 | |||||
D | 250 | 250(从C管中取) | 10 | |||||
E | 250 | 250(从D管中取) | 5 | |||||
F | 250 | 250(从E管中取) | 2.5 | |||||
G | 250 | 0 | 0(空白) | |||||
2.配制 Micro BCA 测试工作液:根据标准品和样品的数量配制测试液。 | ||||||||
1) 配制初始工作液 | ||||||||
初始工作液: 试剂C与试剂B按1:25(体积比)比例配制 | ||||||||
2)测试工作液配制 | ||||||||
测试工作液: 初始工作液与试剂A按1:1(体积比)比例配制 | ||||||||
充分混匀后备用。 | ||||||||
3. 试管及微板检测(蛋白浓度检测范围:2.5-200 μg/ml) | ||||||||
1)按上表准备好标准品及待测样品。 | ||||||||
2)将蛋白样品和测试工作液按照 1:1(体积比)比例加入,充分混匀。在 60 ℃孵育 60 min。 | ||||||||
3)孵育完成后冷却到室温,在 562nm 处读取吸光度值。 | ||||||||
4)标准品与待测样品的吸光度值要扣除空白对照的吸光度值,然后进行浓度的计算。 | ||||||||
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。 |
附表 干扰物质表 | |||||||
化合物 | 耐受浓度 | 化合物 | 耐受浓度 | ||||
缓冲液 | 去垢剂和变性剂 | ||||||
乙酸盐 | 0.2M | Brij35 | 1% | ||||
甘氨酸 | 1M | CHAPS | 1% | ||||
HEPES | 0.1M | 盐酸胍 | 4M | ||||
MES | 50mM | NP-40 | 1% | ||||
MOPS | 50mM | 辛葡糖 | 1% | ||||
Na+-柠檬酸 | <1mM | SDS | 1% | ||||
PIPES | 50mM | Triton X-100 | 1% | ||||
磷酸钠 | 0.1M | 糖类 | |||||
乙酸钠 | 0.2M pH 5.5 | 葡萄糖 | 10mM | ||||
TES | 50mM | 蔗糖 | 1M | ||||
Tris | 0.1M | 螯合剂 | |||||
盐类 | EDTA | 10mM | |||||
硫酸铵 | 干扰 | 还原剂 | |||||
NaCl | 1M | β-巯基乙醇 | 50μM | ||||
尿素 | 3M | DTT | 1mM | ||||
极性化合物 | 其他 | ||||||
DMSO | 5% | 脂类 | 干扰 | ||||
甘油 | 10% | HCl/NaOH | 0.1M | ||||