咽拭子病毒DNA/RNA提取试剂盒参考价： ￥990
价格： ￥891
货品编号： DY6023
规格：
50T
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| 咽拭子病毒DNA/RNA提取试剂盒 | ||||||||
| Allpure DNA/RNA Swab Kit | ||||||||
| 离心柱式 | ||||||||
| Cat No:DY6023 | ||||||||
| Kit Size:50T | ||||||||
| 产品组分 | ||||||||
| 组分 Contents | 50preps | |||||||
| Buffer 1# | 55ml | |||||||
| Buffer 2# | 30ml | |||||||
| Buffer 3#(concentrate) | 11ml | |||||||
| Buffer 4# | 10ml | |||||||
| 离心管 | 50 | |||||||
| 吸附柱 | 50 | |||||||
| 收集管(2ml) | 50 | |||||||
| 储运条件 | ||||||||
| 本试剂盒室温（15-25℃）条件下可保存12个月，更长时间保存可置于2-8℃。 | ||||||||
| 说 明 | ||||||||
| 本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途。 | ||||||||
| 产品简介 | ||||||||
| 德元国际开发的咽拭子病毒DNA/RNA提取试剂盒采用可以特异性结合DNA/RNA的吸附柱和独特的缓冲液系统，专门用于拭子中分离病毒DNA/RNA。病毒核酸特异性地结合到硅基质膜上，而污染物则流过该膜。通过两次高效洗涤完全去除蛋白质等杂质，然后用无RNase的水或试剂盒提供的试剂洗脱高纯度的病毒核酸。由本试剂盒提取的病毒DNA/RNA可直接用于RT-PCR、Real-time RT-PCR、反转录和印迹分析等实验。 | ||||||||
| 实验前准备及注意事项 | ||||||||
| 1. 本实验需要无水乙醇，β-巯基乙醇， 请自备。 | ||||||||
| 2. 样品应避免反复冻融，否则影响提取的得率和质量。样品在Buffer 1#中，可于-70℃保存一个月。 | ||||||||
| 3. 全部离心步骤可在室温下进行。 | ||||||||
| 4. 使用前请检查Buffer1#是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer1#于56℃水浴重新溶解。Buffer 1#在使用前请加入β-巯基乙醇，至终浓度为1%。如1 ml Buffer 1#加10 μl β-巯基乙醇。 | ||||||||
| 5. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer 3#中加入无水乙醇。 | ||||||||
| 6. 若下游实验对 DNA 非常敏感，建议用不含 RNase 的 DNase I（Cat No：DY6060）对 RNA 进行处理。 | ||||||||
| 7.使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。 | ||||||||
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8. 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸 泡10min，用水彻底冲洗后高压灭菌。 |
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| 9. 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。 | ||||||||
| 操作步骤 | ||||||||
| 1．将鼻/咽拭子样本取样后加入2 ml离心管中。 | ||||||||
| 注意：若样本不能完全浸入Buffer 1#中，可适当增加Buffer 1#体积，第3步中无水乙醇加入量按比例增加。 | ||||||||
| 2． 向离心管中加入1 ml Buffer 1#（使用前检查是否已经加入β-巯基醇），涡旋振荡 15s使Buffer 1#与样本充分混匀。 | ||||||||
| 3. 加入600 μl 无水乙醇，涡旋振荡15s混匀。 | ||||||||
| 4．短暂离心收集附着在管壁及管盖的液体。 | ||||||||
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5． 将步骤 4 所得溶液全部加入吸附柱中(吸附柱应预先装入收集管中)，一次 最多不超过700 μl，可分多次转入。12000 rpm离心 15s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。 |
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| 6． 向吸附柱中加入500 μlBuffer2#，12,000rpm 离心 15s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。 | ||||||||
| 7． 向吸附柱中加入500 μlBuffer3#（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm 离心15s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。 | ||||||||
| 8．重复步骤7。 | ||||||||
| 9. 12,000rpm离2min，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。 | ||||||||
| 注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。 | ||||||||
| 10. 将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入30-50μl Buffer4# ，室温放置2-5min，12,000rpm离心1min，收集集DNA/RNA溶液，-70℃保存,防止降解。 | ||||||||
| 注意：1）Buffer4#体积不应小于30 μl，体积过小影响回收率。 | ||||||||
| 2）如果要提高DNA/RNA的产量，可用30-50 μl新的Buffer4#再次加入吸附柱中，室温放置2-5min，12,000rpm离心1min，收集集DNA/RNA溶液保存。 | ||||||||
| 3)如果要提高DNA/RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置1min，12,000 rpm离心1min。 | ||||||||